乙肝生命周期新发现，HBc泛素化，可能起重要作用。众所周知，针对乙肝病毒生命周期的理解，有助于开发新靶点，也就是我们所说的新治疗药物。那么，到底是什么在HBV生命周期中起着重要作用呢？2020年11月26日，Hana Langer、Barbora Luby等研究人员阐述了这一研究，那就是HBV的核心蛋白（HBc）。
研究人员认为，核心蛋白（HBc），比如在HBV生命周期中的转录调控、RNA包埋、反转录和病毒释放方向都起着重要作用。深入研究后，发现要想完成以上各个功能，HBc将与许多宿主蛋白相互作用，并经历不同的翻译后修饰（PTMs）。而这一发现，正是上述研究人员找到的新机制：乙型肝炎核心蛋白通过K29连接的泛素化进行翻译后修饰（观点来自Cells：捷克科学院有机化学和生物化学研究所等研究人员）。
最常见的PTMs之一是泛素化，它能够改变不同的病毒蛋白功能、稳定性以及细胞内定位。但是，HBc泛素化在HBV生命周期中的作用尚不清楚。所以，研究人员主要介绍是，刚刚新发现了HBc蛋白通过K29连接的泛素化进行翻译后修饰。对野生型HBc、赖氨酸-精氨酸HBc突变体和野生型泛素、单一赖氨酸-精氨酸泛素突变体或接受赖氨酸结构的单一泛素进行一系列共免疫沉淀实验。
研究结果表明，在转染和感染的肝癌细胞中，HBc蛋白可以被泛素化修饰。泛素化主要发生在HBc赖氨酸7上，泛素链的首选链是泛素K29。质谱（MS）分析检测到泛素蛋白连接酶E3组分N-识别素5（UBR5），它作为一种潜在的E3泛素连接酶参与K29连锁泛素化。这些发现强调HBc泛素化可能在HBV生命周期中起重要作用。
简单的讲，以上证明新发现的数据说明，泛素K29的生物学功能与HBc的泛素化直接相关。这些研究结果，还得到了整个HBV基因组和所有病毒蛋白表达的背景下，HBV感染细胞内内源性HBc泛素化的研究支持。负责本项目研究人员给出的观点是：我们仍然能够观察到，使用Ub-K29R的HBc多泛素化的低信号，所以，我们认为，尽管K29连锁泛素化是HBV感染细胞中主要的HBc修饰类型；
但是，涉及其他赖氨酸残基的泛素链也可以聚集在HBc蛋白上。我们没有发现UBL蛋白sumo1-3或ISG15修饰HBc的证据。为检测这些修改，我们使用了UBL修改推荐协议。然而，有可能是我们所用方法对检测HBc-UBL-蛋白相互作用不够敏感。未来，我们还将UBL蛋白对整个HBV病毒的影响有待进一步研究（观点说明来自：发现HBc泛素化的本研究人员）。
本研究人员使用免疫沉淀法结合梯度凝胶Western blot分析，明确区分了肝癌Huh7细胞中HBc的Ub1、Ub2、Ub3和Ubn种。并在蛋白酶体抑制剂MG132存在下，HBc泛素化的强度增加，但泛素化模式没有改变。结果发现，HBc只含有2个赖氨酸残基K7和K96，这2个残基在所有HBV株中都是保守的。这2个赖氨酸残基的作用，在几项研究中得到阐述。
但是，研究人员对K7残基的功能，仍然知之甚少。研究人员根据重组衣壳的晶体结构突变了HBc N端结构域内的52个氨基残基。K96A突变阻断了HBV的释放，但对胞质核衣壳的形成没有影响。然而，K7A-HBc突变的影响在本研究中没有被研究。返回搜狐，查看更多